從懸浮細胞的定義上來說，懸浮細胞是不貼壁的，懸浮生長的細胞，所以由此可知懸浮細胞不需要酶的作用就可以使其從培養容器表面脫離，故懸浮細胞傳代培養的方法較為簡單。一般實驗室中常用直接傳代法和離心傳代法（在發現有細胞碎片的情況下）來處理懸浮細胞。當小伙伴們觀察到懸浮細胞已經長滿至 80%～90%（細胞懸液變黃）的時候，細胞就可以進行傳代操作了。

從顯微鏡下觀察，如果細胞狀態良好（基本無細胞碎片，細胞形態規則）時，則可以選擇直接傳代法。將原瓶中的培養基按比例（具體比例視實驗而定，但是不能太稀，太稀細胞長不起來）分裝到新的培養瓶中，然后補加新鮮培養基（補加的培養基量不能太打，否則會導致細胞因為密度過低而養不起來），然后隔天觀察細胞密度來考慮是否需要補液。

但是當從顯微鏡下觀察，細胞狀態較差時（細胞碎片較多，細胞形態不規則）時，則需要使用離心傳代法。首先，要將細胞懸液轉移到離心管內，1000rpm 離心 5 min；然后棄去上層清液，輕輕地將細胞沉淀彈散（盡量不用吹打，會導致細胞狀態不好甚至死亡），使用新鮮的培養基重懸細胞；最后用吸管吸取適量細胞懸液，裝入新的培養瓶，再加入適量的新鮮培養基，繼續培養。